02002D0364 — HR — 02.07.2020 — 003.001
Ovaj je tekst namijenjen isključivo dokumentiranju i nema pravni učinak. Institucije Unije nisu odgovorne za njegov sadržaj. Vjerodostojne inačice relevantnih akata, uključujući njihove preambule, one su koje su objavljene u Službenom listu Europske unije i dostupne u EUR-Lexu. Tim službenim tekstovima može se izravno pristupiti putem poveznica sadržanih u ovom dokumentu.
|
ODLUKA KOMISIJE od 7. svibnja 2002. o zajedničkim tehničkim specifikacijama za in vitro dijagnostičke medicinske proizvode (priopćena pod brojem dokumenta C(2002) 1344) (Tekst značajan za EGP) ( L 131 16.5.2002, 17) |
Koju je izmijenila:
|
|
|
|||
|
br. |
stranica |
datum |
||
|
L 39 |
34 |
10.2.2009 |
||
|
L 318 |
25 |
4.12.2009 |
||
|
L 341 |
63 |
22.12.2011 |
||
|
PROVEDBENA ODLUKA KOMISIJE (EU) 2019/1244 Tekst značajan za EGP оd 1. srpnja 2019. |
L 193 |
1 |
19.7.2019 |
|
|
(*) |
Ovaj akt nije nikada objavljen na hrvatskome. |
ODLUKA KOMISIJE
od 7. svibnja 2002.
o zajedničkim tehničkim specifikacijama za in vitro dijagnostičke medicinske proizvode
(priopćena pod brojem dokumenta C(2002) 1344)
(Tekst značajan za EGP)
(2002/364/EZ)
Članak 1.
Tehničke specifikacije iz Priloga ovoj Odluci donesene su kao zajedničke tehničke specifikacije za in vitro dijagnostičke medicinske proizvode u listi A, Priloga II. Direktivi 98/79/EZ.
Članak 2.
Ova je odluka upućena državama članicama.
PRILOG
ZAJEDNIČKE TEHNIČKE SPECIFIKACIJE (CTS) ZA IN VITRO DIJAGNOSTIČKE MEDICINSKE PROIZVODE
1. PODRUČJE PRIMJENE
Zajedničke tehničke specifikacije utvrđene u ovom Prilogu primjenjuju se za potrebe Priloga II. popisa A Direktivi 98/79/EZ.
2. DEFINICIJE I POJMOVI
(Dijagnostička) osjetljivost
Vjerojatnost da će proizvod dati pozitivan rezultat u prisutnosti ciljnog markera.
Stvarno pozitivan
Uzorak za koji se zna da je pozitivan na ciljni marker i da ga je proizvod pravilno kategorizirao.
Lažno negativan
Uzorak za koji se zna da je pozitivan na ciljni marker i da ga je proizvod nepravilno kategorizirao.
(Dijagnostička) specifičnost
Vjerojatnost da proizvod daje negativan rezultat u nedostatku ciljnog markera.
Lažno pozitivan
Uzorak za koji se zna da je negativan na ciljni marker i da ga je proizvod nepravilno kategorizirao.
Stvarno negativan
Uzorak za koji se zna da je negativan na ciljni marker i da ga je proizvod pravilno kategorizirao.
Analitička osjetljivost
Analitička osjetljivost može se izraziti kao granica detekcije, t.j. najmanja količina ciljnog markera koja se može precizno otkriti.
Analitička specifičnost
Analitička specifičnost znači sposobnost metode da utvrdi prisutnost samo ciljnog markera.
Tehnike umnožavanja nukleinske kiseline (NAT)
Pojam „NAT” koristi se za otkrivanje i/ili mjerenje količine nukleinskih kiselina umnožavanjem ciljne sekvence, pojačavanjem signala ili hibridizacijom.
Brzi test
„Brzi test” znači kvalitativni ili polukvantitativni in vitro dijagnostički medicinski proizvodi, koji se koriste pojedinačno ili u malim serijama, koji uključuju neautomatizirane postupke i namijenjeni su da daju brzi rezultat.
Robusnost
Robusnost analitičkog postupka znači sposobnost analitičkog postupka da na njega ne utječu male ali namjerne varijacije parametara metode i ukazuje na njegovu pouzdanost tijekom normalne upotrebe.
Stopa greške cijelog sustava
Stopa greške cijelog sustava znači učestalost grešaka kada se cijeli proces provodi kako je propisao proizvođač.
Potvrdni test
Potvrdni test znači test koji se koristi za potvrdu reaktivnog rezultata iz probirnog testa.
Test tipizacije virusa
Test tipizacije virusa znači test koji se koristi za tipizaciju već poznatih pozitivnih uzoraka, a ne koristi se za primarnu dijagnozu infekcije ili za probir.
Serokonverzija HIV uzoraka
Serokonverzija HIV uzoraka znači:
Rana serokonverzija HIV uzoraka
Rana serokonverzija HIV uzoraka znači:
3. ZAJEDNIČKE TEHNIČKE SPECIFIKACIJE (CTS) ZA PROIZVODE IZ PRILOGA II., S POPISA A DIREKTIVE 98/79/EZ
3.1. CTS za ocjenjivanje uspješnosti reagensa ili proizvoda reagensa za otkrivanje, potvrđivanje i kvantifikaciju markera HIV infekcije (HIV 1 i 2), HTLV I i II, i hepatitisa B, C, D u ljudskim uzorcima
Opća načela
|
3.1.1. |
Proizvodi za otkrivanje virusnih infekcija moraju ispunjavati zahtjeve za osjetljivost i specifičnost koji su utvrđeni u tablici 1. i tablici 5. prema vrsti virusa i komponentama koje se otkrivaju (antigen i/ili antitijelo). Vidjeti i načelo 3.1.11. za testove probira. |
|
3.1.2. |
Proizvodi koje je proizvođač namijenio za testiranje tjelesnih tekućina koje nisu serum ili plazma, npr. urin, slina itd., trebaju ispunjavati iste zahtjeve CTS za osjetljivost i specifičnost kao testovi seruma ili plazme. Ocjenjivanje uspješnosti treba testirati uzorke istih pojedinaca u oba testa da bi bili odobreno te u odgovarajućem testu seruma ili plazme. |
|
3.1.3. |
Proizvodi koje je proizvođač namijenio za samotest, t.j. kućnu upotrebu, trebaju ispunjavati iste zahtjeve CTS za osjetljivost i specifičnost kao odgovrajući proizvodi za profesionalnu upotrebu. Relevantne dijelove ocjenjivanja uspješnosti provode (ili ponavljaju) odgovarajući nestručnjaci kako bi potvrdili djelovanje proizvoda i uputa za upotrebu. |
|
3.1.4. |
Sve ocjene uspješnosti treba provoditi u izravnoj usporedbi s potvrđenim najsuvremenijim proizvodom. Proizvod koji se koristi za usporedbu treba imati oznaku CE ako je na tržištu u vrijeme ocjenjivanja uspješnosti. |
|
3.1.5. |
Ako se kao dio ocjenjivanja utvre međusobno različiti rezultati testova, te rezultate treba koliko je moguće pojasniti, na primjer:
—
ocjenjivanjem uzorka koji se razlikuje od drugih u daljnjim sistemskim testiranjima,
—
korištenjem alternativne metode ili markera,
—
ponovnim pregledom kliničkog statusa i dijagnoze pacijenta, i
—
testiranjem daljnjih uzoraka.
|
|
3.1.6. |
Ocjenjivanja uspješnosti treba provoditi na populaciji jednakovrijednoj europskoj populaciji. |
|
3.1.7. |
Pozitivni uzorci korišteni u ocjenjivanju uspješnosti odabiru se tako da odražavaju različite faze odgovarajuće-ih) bolesti, različite uzorke antitijela, različite genotipe, različite podtipove, mutante itd. |
|
3.1.8. |
Osjetljivost stvarno pozitivnih i serkonverzijskih uzroaka ocjenjuje se kako slijedi:
3.1.8.1.
Osjetljivost dijagnostičkog testa tijekom serokonverzije treba odgovrati najnovijem tehničkom razvoju. Bez obzira provodi li daljnje testiranje istih ili dodatnih serkonverzijskih panela provodi prijavljeno tijelo ili proizvođač, rezultati trebaju potvrditi početne podatke ocjenjivanja uspješnosti (vidjeti tablicu 1). Serokonverzijski paneli trebaju početi s negativnim uzrocima krvi, a intervali između trebaju biti kratki.
3.1.8.2.
Za proizvode za testiranje krvi (osim testova na HBsAg i antitijela protiv HBc), svi stvarno pozitivni uzorci utvrđuju se kao pozitivni od proizvoda koji ima oznaku CE (tablica 1). Za testove na HBsAg i antitijela protiv HBc novi proizvod treba imati ukupnu uspješnost brem jednakovrijednu onoj od potvrđenog proizvoda (vidjeti 3.1.4.).
3.1.8.3.
Što se tiče testova na HIV:
—
svi serokonverzijski HIV uzroci utvrđuju se kao pozitivni i
—
barem 40 ranih serokonverzijskih HIV uzoraka se testira. Rezultati trebaju odgovarati najnovijem tehničkom razvoju.
|
|
3.1.9. |
Ocjenjivanje uspješnosti probirnih testova uključuje 25 pozitivnih (ako su dostupni u slučaju rijetkih infekcija) uzoraka svježeg seruma i/ili plazme uzetih na dan testiranja (≤ 1 dan nakon uzorkovanja). |
|
3.1.10. |
Negativni uzorci korišteni u ocjeni uspješnosti definiraju se tako da odražavaju ciljnu populaciju za koju je test namijenjen, na primjer davatelje krvi, hospitalizirane pacijente, trudnice itd. |
|
3.1.11. |
Za ocjenjivanja uspješnosti probirnih testova (tablica 1) populacije darivatelja krvi istražuju se barem u dva centra za darivanje krvi i sastoje se od uzastopnih darivanja krvi, koja nisu odabrama za isključivanje osoba koje daruju krv prvi put. |
|
3.1.12. |
Proizvodi trebaju imati specifičnost od najmanje 99,5 % za darivanja krvi, osim ako je drukčije navedeno u popratnim tablicama. Specifičnost se izračunava koristeći učestalost ponovljeno reaktivnih (tj. lažno pozitivnih) rezultata kod darivatelja krvi negativnih na ciljni marker. |
|
3.1.13. |
U sklopu ocjenjivanja uspješnosti proizvode treba ocjenjivati kako bi se utvrdio učinak potencijalno intereferirajućih tvari. Potencijalno interferirajuće tvari koje treba ocijeniti ovisit će do neke mjere o sastavu reagensa i strukturi testa. Potencijalno interferirajuće tvari utvrđuju se kao dio analize rizika koju zahtijevaju bitni zahtjevi za svaki novi proizvod, ali mogu na primjer uključivati:
—
uzorke koji predstavljaju „srodne” infekcije,
—
uzorke od višerotkinja, tj. žena koje su imale više od jedne trudnoće, ili pacijenata s pozitivnim reumatoidnim faktorom,
—
kod rekombinantnih antigena, ljudska antitijela na dijelove ekspresijskog sustava, na primjer na E. coli ili gljivice.
|
|
3.1.14. |
Za proizvode koje je proizvođač namijenio da se koriste sa serumom i plazmom, ocjenjivanje uspješnosti mora pokazati jednaku uspješnost u serumu i u plazmi. To treba pokazati u najmanje 50 darivanja krvi (25 pozitivnih i 25 negativnih). |
|
3.1.15. |
Za proizvode koji su namijenjeni za korištenje s plazmom, ocjenjivanje uspješnosti treba potvrditi uspješnost proizvoda koristeći sve antikoagulante koje proizvođač navodi za korištenje s proizvodom. To treba pokazati u najmanje 50 darivanja krvi (25 pozitivnih i 25 negativnih). |
|
3.1.16. |
Kao dio zahtijevane analize rizika stopa greške cijelog sustava koja dovodi do lažno negativnih rezultata određuje se u ponovljenim testovima slabo pozitivnih uzoraka. |
|
3.1.17. |
Ako novi in vitro dijagnostički medicinski proizvod s popisa A Priloga II. nije izričito obuhvaćen zahedničkim tehničkim specifikacijama, treba uzeti u obzir zajedničku tehničku specifikaciju za srodni proizvod. Srodni proizvodi mogu se utvrditi na različitim temeljima, npr. istim ili sličnim namijenjenim upotrebama ili sličnim rizicima. |
3.2. Dodatni zahtjevi za kombinirane testove na HIV antigen i antitijela na HIV odnosno HCV antigen i antitijela na HCV
|
3.2.1. |
Kombinirani testovi na HIV antigen i antitijela na HIV predviđeni za otkrivanje HIV-1 p24 antigena i antitijela na HIV-1/2 moraju ispunjavati zahtjeve za osjetljivost i specifičnost utvrđene u tablici 1. i tablici 5. |
|
3.2.2. |
Kombinirani testovi na antigen virusa hepatitisa C (HCV) i antitijela na HCV predviđeni za otkrivanje HCV antigena i antitijela na HCV moraju ispunjavati zahtjeve za osjetljivost i specifičnost utvrđene u tablici 1. i tablici 5. Serokonverzijski paneli za HCV za ocjenu kombiniranih testova na HCV antigen i antitijela na HCV počinju s jednim ili više negativnih uzoraka krvi i sastoje se od članova panela u ranoj fazi infekcije HCV-om (pozitivni na HCV antigen jezgre i/ili HCV RNA, ali negativni na anti-HCV antitijela). Kombinirani testovi na HCV antigen i antitijela na HCV moraju pokazivati pojačanu osjetljivost u ranoj fazi infekcije HCV-om u usporedbi s testovima samo na antitijela na HCV. |
3.3. Dodatni zahtjevi za tehnike umnožavanja nukleinske kiseline (NAT)
Kriteriji ocjenjivanja uspješnosti NAT testova mogu se naći u tablici 2.
|
3.3.1. |
Za testove umnožavanja ciljne sekvence, kontrola funkcionalnosti za svaki uzorak testa (unutarnja kontrola) treba odražavati najnovija tehnička dostignuća. Ova se kontrola koristi što je više moguće tijekom cijelog procesa, tj. ekstrakcije, amplifikacije/hibridizacije, otkrivanja. |
|
3.3.2. |
Analitička osjetljivost ili granica otkrivanja za NAT testove izražava se graničnom vrijednosti od 95 % pozitivnih rezultata. To je koncentracija analita u kojoj 95 % testiranja daje pozitivne rezultate nakon uzastopnih razrjeđivanja međunarodnog referentnog materijala, ako je dostupan, kao što je međunarodni standard Svjetske zdravstvene organizacije ili referentni materijal umjeren prema međunarodnom standardu Svjetske zdravstvene organizacije. |
|
3.3.2a. |
Kvalitativni NAT testovi za HIV namijenjeni otkrivanju prisutnosti HIV-a u krvi, krvnim sastojcima, stanicama, tkivima ili organima, ili u bilo kojim njihovim derivatima, u svrhu ocjenjivanja njihove prikladnosti za transfuziju, transplantaciju ili unošenje stanica osmišljavaju se tako da se njima otkrivaju i HIV-1 i HIV-2. |
|
3.3.2b. |
Kvalitativni NAT testovi za HIV, osim testova tipizacije virusa, osmišljavaju se tako da se nadoknadi mogući propust pri otkrivanju ciljne regije za NAT test za HIV-1, primjerice upotrebom dviju neovisnih ciljnih regija. |
|
3.3.3. |
Otkrivanje genotipa prikazuje se odgovarajućim potvrđivanjem sastava primera ili sonde i također se potvrđuje testiranjem karakterističnih genotipiziranih uzoraka. |
|
3.3.4. |
Rezultati kvantitativnih NAT mogu se slijediti do međunarodnih standarda ili kalibriranih referentnih materijala, ako su dostupni, te se izražavaju u međunarodnim jedinicama korištenim u određenom području primjene. |
|
3.3.5. |
NAT testovi mogu se koristiti za otkrivanje virusa u uzrocima negativnim na antitijela tj. u predserokonverzijskim uzorcima. Virusi u imunokompleksima mogu se ponašati drukčije od slobodnih virusa, na primjer tijekom faze centrifugiranja. Stoga je važno da tijekom studija robusnosti budu uključeni uzorci negativni na antitijela (predserokonverzijski). |
|
3.3.6. |
Za istraživanje potencijalnog prijenosa, tijekom studija robusnosti treba provesti barem pet testiranja s naizmjence visoko pozitivnim i negativnim uzorcima. Visoko pozitivni uzroci obuhvaćaju uzorke s prirodno visokim titrom virusa. |
|
3.3.7. |
Stopa greške cijelog sustava koja dovodi do lažno negativnih rezultata određuje se testiranje nisko pozitivnih uzoraka. Nisko pozitivni uzorci sadrže koncentraciju virusa ekvivalentnu tri puta 95 % pozitivne granične vrijednosti koncentracije virusa. |
3.4. CTS za testiranje reagensa i njhovih proizvoda za otkrivanje, potvrđivanje i kvantifikaciju markera HIV infekcije (HIV 1 i 2), HTLV I i II, i hepatitisa B, C, D (samo imunološki testovi) u ljudskim uzorcima, koje proizvođač provodi prije puštanja proizvoda u promet
|
3.4.1. |
Proizvođačevi kriteriji za testiranje prije puštanja proizvoda u promet osiguravaju da svaka serija dosljedno utvrđuje relevantne antigene, epitope i antitijela. |
|
3.4.2. |
Testiranje proizvodnih serija prije puštanja u promet uključuje barem 100 uzoraka negativnih na odgovarajući analit. |
3.5. CTS za ocjenu uspješnosti reagensa i njihovih proizvoda za utvrđivanje sljedećih antigena krvnih grupa: ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B) sustava krvnih grupa ABO; RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) sustava krvnih grupa Rh; KEL1 (K) sustava krvnih grupa Kell
Kriteriji za ocjenu uspješnosti reagensa i njihovih proizvoda za utvrđivanje antigena krvnih grupa: ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B) sustava krvnih grupa ABO; RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) sustava krvnih grupa Rh; KEL1 (K) sustava krvnih grupa Kell nalaze se u tablici 9.
|
3.5.1. |
Sve ocjene uspješnosti provode se u izravnoj usporeddbi s potvrđenim proizvodom najnovije tehnologije. Proizvod za usporedbu jest onaj s oznakom CE, ako je na tržištu u vrijeme ocjenjivanja uspješnosti. |
|
3.5.2. |
Ako se utvrde međusobno različiti rezutati testa utvrde kao dio ocjene, ti se rezultati što je više moguće pojašnjavaju, na primjer:
—
ocjenjivanjem različitog uzorka u daljnjim sustavima testiranja,
—
korištenjem alternativne metode.
|
|
3.5.3. |
Ocjenjivanja uspješnosti treba provoditi na populaciji jednakovrijednoj europskoj populaciji. |
|
3.5.4. |
Pozitivni uzorci korišteni u ocjeni uspješnosti odabiru se da odražavaju raznoliko i slabo izražavanje antigena. |
|
3.5.5. |
U sklopu ocjenjivanja uspješnosti proizvode treba ocjenjivati kako bi se utvrdio učinak potencijalno intereferirajućih tvari. Potencijalno interferirajuće tvari koje treba ocijeniti ovisit će do neke mjere o sastavu reagensa i strukturi testa. Potencijalno interferirajuće tvari utvrđuju se kao dio analize rizika koju zahtijevaju bitni zahtjevi za svaki novi proizvod. |
|
3.5.6. |
Za uređaje namijenjene za korištenje s plazmom ocjenjivanje uspješnosti provjerava uspješnost proizvoda koristeći sve antikoagulanse koje proizvođač navodi za korištenje s proizvodom. To se dokazuje na najmanje 50 darivanja uzoraka. |
3.6. CTS za testiranje reagensa i njihovih proizvoda za utvrđivanje sljedećih antigena krvnih grupa: ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B) sustava krvnih grupa ABO; RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) sustava krvnih grupa Rh; KEL1 (K) sustava krvnih grupa Kell, koje proizvođač provodi prije puštanja proizvoda u promet
|
3.6.1. |
Proizvođačevi kriteriji za testiranje prije puštanja u promet osiguravaju da svaka serija dosljedno utvrđuje relevantne antigene, epitope i antitijela. |
|
3.6.2. |
Zahtjevi za proizvođačevo testiranje serija prije puštanja u promet navedeni su u tablici 10. |
3.7. Zajedničke tehničke specifikacije za probe na varijantu Creutzfeldt-Jakobove bolesti (vCJD) za probir krvi
Zajedničke tehničke specifikacije za probe na varijantu Creutzfeldt-Jakobove bolesti (vCJD) za probir krvi navedene su u Tablici 11.
Tablica 1
Testovi probira: anti-HIV 1/2, HIV 1/2 antigen/antitijelo, anti-HTLV I/II, anti-HCV, HCV antigen/antitijelo, HBs antigen, anti-HBc
|
|
|
anti-HIV 1/2, HIV 1/2 antigen/antitijelo |
Anti-HTLV-I/II |
anti-HCV, HCV antigen/antitijelo |
HBs antigen |
Anti-HBc |
|
Dijagnostička osjetljivost |
Pozitivni uzorci |
400 HIV-1 100 HIV-2 uključujući 40 podtipova koji nisu B, svi dostupni HIV/1 podtipovi moraju biti zastupljeni s najmanje 3 uzorka po podtipu |
300 HTLV-I 100 HTLV-II |
400 (pozitivni uzorci) Uključujući uzorke iz različitih faza infekcije i odražavajući različite uzorke antitijela. Genotip 1 – 4: > 20 uzoraka po genotipu (uključujući podtipove genotipa 4 koji nisu a); 5: > 5 uzoraka; 6: ako je dostupno |
400 uključujući uzimanje u obzir podtipova |
400 uključujući ocjenu drugih HBV-markera |
|
Serokonverzijski paneli |
20 panela 10 dodatnih panela (kod prijavljenog tijela ili proizvođača) |
Definirat će se kad budu dostupni. |
20 panela 10 dodatnih panela (kod prijavljenog tijela ili proizvođača) |
20 panela 10 dodatnih panela (kod prijavljenog tijela ili proizvođača) |
Definirat će se kad budu dostupni. |
|
|
Analitička osjetljivost |
Standardi |
|
|
|
0,130 IU/ml (međunarodni standard Svjetske zdravstvene organizacije: treći međunarodni standard za HBs antigen, podtipove ayw1/adw2, HBV genotip B4, NIBSC šifra: 12/226) |
|
|
Specifičnost |
Neodabrani darivatelji (uključujući one koji krv daruju prvi put) |
5 000 |
5 000 |
5 000 |
5 000 |
5 000 |
|
Hospitalizirani pacijenti |
200 |
200 |
200 |
200 |
200 |
|
|
Uzorci krvi kod kojih je moguća unakrsna reakcija (RF+, srodni virusi, trudnice itd.) |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
Tablica 2
NAT testovi za HIV1, HCV, HBV, HTLV I/II (kvalitativni i kvantitativni; bez molekularne tipizacije)
|
HIV1 |
HCV |
HBV |
HTLV I/II |
Kriteriji prihvatljivosti |
|||||
|
NAT |
kvalitativni |
kvantitativni |
kvalitativni |
kvantitativni |
kvalitativni |
kvantitativni |
kvalitativni |
kvantitativni |
|
|
Kao kvantitativni za HIV |
Kao kvantitativni za HIV |
Kao kvantitativni za HIV |
|||||||
|
Osjetljivost Granica otkrivanja Otkrivanje analitičke osjetljivosti (IU/ml; definirani standardima WHO-a ili kalibriranim referentnim materijalima) |
Sukladno validacijskoj smjernici EP (1): više serija razrjeđivanja do granične koncentracije; statističke analize (npr. Probit analiza) na temelju najmanje 24 kopije; izračun 95 % granične vrijednosti |
Otkrivanje granice: kao za kvalitativne testove; Granica kvantifikacije: razrjeđivanja (half-log10 ili manje) kalibriranih referentnih pripravaka, definicija donje i gornje granice kvantifikacije, preciznost, točnost, „linearni’ mjerni raspon, ”dinamički raspon’. Treba pokazati ponovljivost pri različitim razinama koncentracije |
Sukladno validacijskoj smjernici EP (1): više serija razrjeđivanja do granične koncentracije; statističke analize (npr. Probit analiza) na temelju najmanje 24 kopije; izračun 95 % granične vrijednosti |
|
Sukladno validacijskoj smjernici EP (1): više serija razrjeđivanja do granične koncentracije; statističke analize (npr. Probit analiza) na temelju najmanje 24 kopije; izračun 95 % granične vrijednosti; izračun 95 % granične vrijednosti |
|
Sukladno validacijskoj smjernici EP (1): više serija razrjeđivanja do granične koncentracije; statističke analize (npr. Probit analiza) na temelju najmanje 24 kopije; izračun 95 % granične vrijednosti |
|
|
|
Učinkovitost otkrivanja/kvantifikacije genotipa/podtipa |
Najmanje 10 uzoraka po podtipu (ako su dostupni) |
Serije razrjeđivanja svih važnih genotipova/podtipova, po mogućnosti referentnih materijala, tamo gdje su dostupni |
Najmanje 10 uzoraka po genotipu (ako su dostupni) |
|
Ako su dostupni kalibrirani referentni materijali za genotipove |
|
Ako su dostupni kalibrirani referentni materijali za genotipove |
|
|
|
Supernatanti stanične kulture (mogu biti zamjena za rijetke podtipove HIV 1) |
Mogu se rabiti transkripcije odnosno plazmidi kvantificirani odgovarajućom metodom. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Sukladno validacijskoj smjernici EP (1) ako su dostupni kalibrirani referentni materijali za podtipove; in vitro transkripcije ulaze u obzir |
|
Sukladno validacijskoj smjernici EP (1) ako su dostupni kalibrirani referentni materijali za podtipove; in vitro transkripcije ulaze u obzir |
|
Sukladno validacijskoj smjernici EP (1) ako su dostupni kalibrirani referentni materijali za podtipove; in vitro transkripcije ulaze u obzir |
|
Sukladno validacijskoj smjernici EP (1) ako su dostupni kalibrirani referentni materijali za podtipove; in vitro transkripcije ulaze u obzir |
|
|
|
|
Dijagnostička specifilčnost Negativni uzorci |
500 davatelja krvi |
100 davatelja krvi |
500 davatelja krvi |
|
500 davatelja krvi |
|
500 individualnih darivanja krvi |
|
|
|
Markeri kod kojih je moguća unakrižna reakcija |
Dokazom prikladnosti namjene testa (npr. usporedbom sekvenci) i/ili testiranjem najmanje 10 ljudskih uzoraka pozitivnih na retroviruse (npr. HTLV) |
Kao za kvalitativne testove |
Namjenom testa i/ili testiranjem najmanje 10 ljudskih uzoraka pozitivnih na flaviviruse (npr. HGV, YFV) |
|
Namjenom testa i/ili testiranjem najmanje 10 drugih uzoraka pozitivnih na virusni DNA |
|
Namjenom testa i/ili testiranjem najmanje 10 ljudskih uzoraka pozitivnih na retroviruse (npr. HIV) |
|
|
|
Robusnost |
|
Kao za kvalitativne testove |
|
|
|
|
|
|
|
|
Križna kontaminacija |
Najmanje 5 pokušaja izmjenjujući visoko pozitivne (prirodno nastale) i negativne uzorke |
|
Najmanje 5 pokušaja izmjenjujući visoko pozitivne (prirodno nastale) i negativne uzorke |
|
Najmanje 5 pokušaja izmjenjujući visoko pozitivne (prirodno nastale) i negativne uzorke |
|
Najmanje 5 pokušaja izmjenjujući visoko pozitivne (prirodno nastale) i negativne uzorke |
|
|
|
Inhibicija |
Unutarnja kontrola, najbolje kroz cijeli postupak NAT |
|
Unutarnja kontrola, najbolje kroz cijeli postupak NAT |
|
Unutarnja kontrola, najbolje kroz cijeli postupak NAT |
|
Unutarnja kontrola, najbolje kroz cijeli postupak NAT |
|
|
|
Stopa greške cijelog sustava koja dovodi do lažno negativnih rezultata |
Najmanje 100 virusom obogaćenih uzoraka s koncentracijom 3 puta većom od 95 % pozitivne granične vrijednosti |
|
Najmanje 100 virusom obogaćenih uzoraka s koncentracijom 3 puta većom od 95 % pozitivne granične vrijednosti |
|
Najmanje 100 virusom obogaćenih uzoraka s koncentracijom 3 puta većom od 95 % pozitivne granične vrijednosti |
|
Najmanje 100 virusom obogaćenih uzoraka s koncentracijom 3 puta većom od 95 % pozitivne granične vrijednosti |
|
99/100 testova su pozitivni |
|
(1) Smjernica Europske farmakopeje. Napomene: Kriterij prihvatljivosti za„stopu greške cijelog sustava koja dovodi do lažnih negativnih rezultata” je 99/100 pozitivnih testova. Za kvantitativne NAT-e provest će se studija na najmanje 100 pozitivnih uzoraka koji odražavaju rutinske uvjete korisnika (npr. bez predodabira uzoraka). Komparativni rezultati s drugim sustavom testiranja NAT generirat će se usporedo. Za kvalitativne NAT-e provest će se studija o dijagnostičkoj osjetljivosti koristeći najmanje 10 serokonverzijskih panela. Komparativni rezultati s drugim sustavom testiranja NAT generirat će se usporedo. |
|||||||||
Tablica 3
Brzi testovi: anti-HIV 1 and 2, anti-HCV, HBsAg, anti-HBc, anti-HTLV I i II
|
|
|
Anti-HIV 1/2 |
Anti-HCV |
HBsAg |
Anti-HBc |
Anti-HTLV I/II |
Kriteriji prihvatljivosti |
|
Dijagnostička osjetljivost |
Pozitivni uzorci |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
|
Serokonverzijski paneli |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
Isti kriteriji kao za probirne testove |
|
|
Dijagnostička specifičnost |
Negativni uzorci |
1 000 darivanja krvi |
1 000 darivanja krvi |
1 000 darivanja krvi |
1 000 darivanja krvi |
1 000 darivanja krvi |
≥ 99 % (anti-HBc: ≥ 96 %) |
|
200 kliničkih uzoraka |
200 kliničkih uzoraka |
200 kliničkih uzoraka |
200 kliničkih uzoraka |
200 kliničkih uzoraka |
|||
|
200 uzoraka od trudnica |
200 uzoraka od trudnica |
200 uzoraka od trudnica |
|
200 uzoraka od trudnica |
|||
|
100 potencijalno interferirajućih uzoraka |
100 potencijalno interferirajućih uzoraka |
100 potencijalno interferirajućih uzoraka |
100 potencijalno interferirajućih uzoraka |
100 potencijalno interferirajućih uzoraka |
Tablica 4
Potvrdni/dopunski testovi na anti-HIV 1 i 2, anti-HTLV I i II, anti-HCV, HBsAg
|
|
|
Potvrdni test na anti-HIV |
Potvrdni test na anti-HTLV |
Dopunski test na HCV |
Potvrdni test na HBsAg |
Kriteriji prihvatljivosti |
|
Dijagnostička osjetljivost |
Pozitivni uzorci |
200 HIV-1 i 100 HIV-2 |
200 HTLV-I i 100 HTLV-II |
300 HCV (pozitivni uzorci) |
300 HBsAg |
Ispravno prepoznavanje kao pozitivno (ili neodređeno), ne kao negativno |
|
Uključujući uzorke iz različitih faza infekcije koji odražavaju različite obrasce antitijela |
|
Uključujući uzorke iz različitih faza infekcije koji odražavaju različite obrasce antitijela. Genotipovi 1 – 4: > 20 uzoraka (uključujući podtipove koji nisu a genotipa 4); 5: > 5 uzoraka; 6: ako je dostupno |
Uključujući uzorke iz različitih faza infekcije 20 „visoko pozitivnih” uzoraka (> 26 IU/ml); 20 uzoraka u graničnom rasponu |
|
||
|
Serokonverzijski paneli |
15 serokonverzijskih panela/panela niskog titra |
|
15 serokonverzijskih panela/panela niskog titra |
15 serokonverzijskih panela/panela niskog titra |
|
|
|
Analitička osjetljivost |
Standardi |
|
|
|
Drugi međunarodni standard za HBsAg, podtip adw2, genotip A, NIBSC šifra: 00/588 |
|
|
Dijagnostička specifičnost |
Negativni uzorci |
200 darivanja krvi |
200 darivanja krvi |
200 darivanja krvi |
10 lažno pozitivnih dostupnih iz ocjene uspješnosti probirnog testa (1). |
Bez lažno pozitivnih rezultata/ (1) bez neutralizacije |
|
200 kliničkih uzoraka uključujući trudnice |
200 kliničkih uzoraka uključujući trudnice |
200 kliničkih uzoraka uključujući trudnice |
|
|
||
|
50 potencijalno interferirajućih uzoraka, uključujući uzorke s neodređenim rezultatima u drugim potvrdnim testovima |
50 potencijalno interferirajućih uzoraka, uključujući uzorke s neodređenim rezultatima u drugim potvrdnim testovima |
50 potencijalno interferirajućih uzoraka, uključujući uzorke s neodređenim rezultatima u drugim potvrdnim testovima |
50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
|
||
|
(1) Kriteriji prihvatljivosti: bez neutralizacije kod potvrdnog testa HBsAg. |
||||||
Tablica 5
HIV 1 antigen, HIV antigen/antitijelo, HCV antigen, HCV antigen/antitijelo
|
|
Testovi na HIV-1 antigen te na HIV antigen / antitijela na HIV |
Testovi na HCV antigen te na HCV antigen / antitijela na HCV |
Kriteriji prihvatljivosti |
|
|
Dijagnostička osjetljivost |
Pozitivni uzorci |
50 pozitivnih na HIV-1 antigen 50 supernatanata staničnih kultura, uključujući različite HIV-1 podtipove i HIV-2 |
25 uzoraka pozitivnih na HCV antigen jezgre i/ili HCV RNA, ali negativnih na anti-HCV antitijela, koji se sastoje od HCV genotipova 1 – 6 (ako genotip nije dostupan, navodi se obrazloženje) |
Vidjeti opće načelo u § 3.1.8. |
|
Serokonverzijski paneli (1) |
20 serokonverzijskih panela / panela s niskim titrom |
20 serokonverzijskih panela / panela s niskim titrom |
|
|
|
Analitička osjetljivost |
Standardi |
HIV-1 p24 antigen, prvi međunarodni referentni reagens, NIBSC šifra: 90/636 |
Granica otkrivanja HCV antigena jezgre istražuje se primjenom razrjeđenja međunarodnog standarda Svjetske zdravstvene organizacije za HCV antigen jezgre: (oznaka proizvoda HCV antigena jezgre: PEI 129096/12) |
Za HIV-1 p24 antigen: ≤ 2 IU/ml |
|
Dijagnostička specifičnost |
|
200 darivanja krvi 200 kliničkih uzoraka 50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
200 darivanja krvi, 200 kliničkih uzoraka, 50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
> 99,5 % nakon neutralizacije ili, ako ni jedan test neutralizacije nije dostupan, nakon utvrđivanja statusa uzorka u skladu s općim načelima u § 3.1.5 |
|
(1) Ukupan broj serokonverzijskih panela za kombinirane testove na antigen/antitijelo (iz tablica 1. i 5.) ne treba biti veći od 30. |
||||
Tablica 6
Test za određivanje serotipa i genotipa: HCV
|
|
Test za određivanje serotipa i genotipa HCV |
Kriteriji prihvatljivosti |
|
|
Dijagnostička osjetljivost |
Pozitivni uzorci |
200 (pozitivnih uzoraka) Uključujući uzorke iz različitih faza infekcije koji odražavaju različite uzorke antitijela. Genotipovi 1 – 4: > 20 uzoraka (uključujući podipove koji nisu a genotipa 4) 5: > 5 uzoraka; 6: ako je raspoloživo |
> 95 % podudarnosti između serotipa i genotipa ≥ 95 % podudarnosti između genotipa i sekvenciranja |
|
Dijagnostička specifičnost |
Negativni uzorci |
100 |
|
Tablica 7
HBV markeri: anti-HBs, anti HBc IgM, anti-HBe, HBeAg
|
|
Anti-HBs |
Anti-HBc IgM |
Anti-HBe |
HBeAg |
Kriteriji prihvatljivosti |
|
|
Dijagnostička osjetljivost |
Pozitivni uzorci |
100 cijepljenih osoba |
200 |
200 |
200 |
≥ 98 % |
|
100 prirodno zaraženih osoba |
Uključujući uzorke iz različitih faza infekcije (akutne/kronične itd.) Kriteriji prihvatljivosti primjenjuju se na uzorke iz faze akutne infekcije |
Uključujući uzorke iz različitih faza infekcije (akutne/kronične itd.) |
Uključujući uzorke iz različitih faza infekcije (akutne/kronične itd.) |
|||
|
Serokonverzijski paneli |
10 naknadnih ili anti-HBs serokonverzija |
Ako je dostupno |
|
|
|
|
|
Analitička osjetljivost |
Standardi |
WHO prvi međunarodni referentni pripravak 1977; NIBSC, Ujedinjena Kraljevina |
|
|
HBe — Referenzantigen 82; PEI Njemačka |
Anti-HBs: < 10 mIU/ml |
|
Dijagnostička specifičnost |
Negativni uzorci |
500 |
200 darivanja krvi |
200 darivanja krvi |
200 darivanja krvi |
≥ 98 % |
|
Uključujući kliničke uzorke |
200 kliničkih uzoraka |
200 kliničkih uzoraka |
200 kliničkih uzoraka |
|||
|
50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
|||
Tablica 8
HDV markeri: anti-HDV, anti-HDV IgM, delta antigen
|
|
Anti-HDV |
Anti-HDV IgM |
Delta antigen |
Kriteriji prihvatljivosti |
|
|
Dijagnostička osjetljivost |
Pozitivni uzorci |
100 |
50 |
10 |
≥ 98 % |
|
Specifikacija HBV markera |
Specifikacija HBV markera |
Specifikacija HBV markera |
|||
|
Dijagnostička specifičnost |
Negativni uzorci |
200 |
200 |
200 |
≥ 98 % |
|
Uključujući kliničke uzorke |
Uključujući kliničke uzorke |
Uključujući kliničke uzorke |
|||
|
50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
50 potencijalno interferirajućih uzoraka |
|||
Tablica 9
Antigeni krvnih grupa u sustavima krvnih grupa ABO, Rh i Kell
|
|
1 |
2 |
3 |
|
Specifičnost |
Broj testova po preporučenoj metodi |
Ukupni broj uzoraka za testiranje za stavljanje proizvoda na tržište |
Ukupni broj uzoraka za testiranje za novu formulaciju ili za korištenje jasno definiranih reagensa |
|
Anti-ABO1 (anti-A), anti-ABO2 (anti-B), anti-ABO3 (anti-A,B) |
500 |
3 000 |
1 000 |
|
Anti-RH1 (anti-D) |
500 |
3 000 |
1 000 |
|
Anti-RH2 (anti-C), anti-RH4 (anti-c), anti-RH3 (anti-E) |
100 |
1 000 |
200 |
|
Anti-RH5 (anti-e) |
100 |
500 |
200 |
|
Anti-KEL1 (anti-K) |
100 |
500 |
200 |
|
Kriteriji prihvatljivosti: Svi gore navedeni reagensi trebaju pokazati rezultate testa s potvrđenim reagensima s prihvatljivom uspješnosti s obzirom na deklariranu reaktivnost proizvoda. Za potvrđene reagense kod kojih je došlo do promjene ili proširenja korištenja, treba provesti daljnje testiranje u skladu sa zahtjevima iz stupca 1 (iznad). Ocjena uspješnosti anti-D reagensa treba obuhvatiti testove na raspon uzoraka sa slabim RH1 (D) i djelomičnim RH1 (D), ovisno o namijenjenom korištenju proizvoda. Kvalifikacije: Klinički uzorci: 10 % testne populacije Neonatalni uzorci: > 2 % testne populacije ABO uzorci: > 40 % A, B pozitivnih weak D: > 2 % of RH1 (D) positives |
|||
Tablica 10
Kriteriji za proizvodne serije za stavljanje u promet za reagense i njihove proizvode za određivanje antigena krvnih grupa u skupinama krvnih grupa ABO, Rh i Kell
Zahtjevi za testiranje specifičnosti za svaki reagens
1. Testni reagensi
|
Reagensi krvnih grupa |
Minimalni broj kontrolnih stanica za testiranje |
|||||||
|
|
Pozitivne reakcije |
|
Negativne reakcije |
|||||
|
|
A1 |
A2B |
Ax |
|
B |
0 |
|
|
|
Anti-ABO1 (anti-A) |
2 |
2 |
2 (1) |
|
2 |
2 |
|
|
|
|
B |
A1B |
|
|
A1 |
0 |
|
|
|
Anti-ABO2 (anti-B) |
2 |
2 |
|
|
2 |
2 |
|
|
|
|
A1 |
A2 |
Ax |
B |
0 |
|
|
|
|
Anti-ABO3 (anti-A,B) |
2 |
2 |
2 |
2 |
4 |
|
|
|
|
|
R1r |
R2r |
slabo D |
|
r’r |
r’r |
rr |
|
|
Anti-RH1 (anti-D) |
2 |
2 |
2 (1) |
|
1 |
1 |
1 |
|
|
|
R1R2 |
R1r |
r’r |
|
R2R2 |
r’r |
rr |
|
|
Anti-RH2 (anti-C) |
2 |
1 |
1 |
|
1 |
1 |
1 |
|
|
|
R1R2 |
R1r |
r’r |
|
R1R1 |
|
|
|
|
Anti-RH4 (anti-c) |
1 |
2 |
1 |
|
3 |
|
|
|
|
|
R1R2 |
R2r |
r’r |
|
R1R1 |
r’r |
rr |
|
|
Anti-RH 3 (anti-E) |
2 |
1 |
1 |
|
1 |
1 |
1 |
|
|
|
R1R2 |
R2r |
r’r |
|
R2R2 |
|
|
|
|
Anti-RH5 (anti-e) |
2 |
1 |
1 |
|
3 |
|
|
|
|
|
Kk |
|
|
|
kk |
|
|
|
|
Anti-KEL1 (anti-K) |
4 |
|
|
|
3 |
|
|
|
|
(1) Samo pomoću preporučenih tehnika gdje je deklarirana reaktivnost na ove antigene. Napomena: Poliklonalne reagense treba testirati na širem panelu stanica da se potvrdi specifičnost i isključi prisutnost neželjene kontamininacije antitijela. |
||||||||
Kriteriji prihvatljivosti:
Svaka serija reagensa mora davati nedvojbene pozitivne ili negativne rezultate u preporučenim tehnikama u skladu s rezultatima dobivenim iz podataka iz ocjene uspješnosti.
2. Kontrolni materijali (crvena krvna zrnca)
Fenotip crvenih krvnih zrnaca korištenih u kontroli gore navedenih reagensa za tipizaciju krvi treba potvrditi koristeći potvrđeni proizvod.
Tablica 11
Probe na varijantu Creutzfeldt-Jakobove bolesti (vCJD) za probir krvi
|
|
Materijal |
Broj uzoraka |
Kriteriji prihvatljivosti |
|
Analitička osjetljivost |
Ekstrakt mozga s vCJD u ljudskoj plazmi (WHO referentni broj NHBY0/0003) |
24 replikata svakog od tri razrjeđenja materijala pod WHO brojem NHBY0/0003 (1 × 104, 1 × 105, 1 × 106) |
kod 23 od 24 replikata otkriveno 1 × 104 |
|
Ekstrakt slezene s vCJD u ljudskoj plazmi (10 % -tni homogenat slezene — NIBSC referentni broj NHSY0/0009) |
24 replikata svakog od tri razrjeđenja materijala pod NIBSC brojem NHSY0/0009 (1 × 10, 1 × 102, 1 × 103) |
kod 23 od 24 replikata otkriveno 1 × 10 |
|
|
Dijagnostička osjetljivost |
(A) Uzorci iz odgovarajućih životinjskih modela |
Što više uzoraka je razumno moguće i dostupno, a najmanje 10 uzoraka |
90 % |
|
(B) Uzorci uzeti od ljudi s poznatom kliničkom vCJD |
Što više uzoraka je razumno moguće i dostupno, a najmanje 10 uzoraka |
90 % |
|
|
Samo u slučaju kada nije dostupno10 uzoraka: — broj testiranih uzoraka mora biti između 6 i 9 — moraju se testirati svi dostupni uzorci |
najviše jedan lažno negativni rezultat |
||
|
Analitička specifičnost |
Uzorci krvi kod kojih je moguća unakrsna reakcija |
100 |
|
|
Dijagnostička specifičnost |
Uzorci normalne ljudske plazme iz područja male izloženosti goveđoj spongiformnoj encefalopatiji |
5 000 |
najmanje 99,5 % |